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      進(jìn)口胎牛血清-如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

      更新時間:2019-11-26 點擊次數(shù):1261
         如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
        按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
        (1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
        (2) 血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
        (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
        (4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
        (5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
        (6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
        5、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
        一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
        細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
        一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
        如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
        (1)細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
        (2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
        (3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;
        (4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;
        (5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
        細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?
        (1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
        (2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
        (3) 培養(yǎng)基保持jiaPH值7.0- 7.2。
        (4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。
        (5) 掌握細(xì)胞傳代的jia時機,細(xì)胞切勿生長過老。

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