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      NK細胞活化擴增方法,Corning版

      更新時間:2018-02-08 點擊次數:2654

      NK 細胞活化

      1.  熱滅活自體血漿,56°C,30min。離心, 800 xg , 20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血漿,培養備用。
      2.  至少5倍體積的PBS(不含鈣鎂)清洗PBMCs。室溫離心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培養基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
      3. 預包被T-75培養瓶使用前,用PBS(不含鈣鎂)清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養瓶,37°C5% CO2培養。

      注意:第六天之前,如果培養基變黃,細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL需要添加新鮮的NK活化培養基配比10%自體血漿,保持細胞密度在在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。

      NK細胞擴增

      1.  培養第六天,培養液離心,適量NK擴增培養基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)重懸細胞,再轉移到T-225培養瓶或透氣細胞培養袋。
      2. 每隔兩三天,根據細胞擴增狀態,培養體系中添加新鮮的NK擴增培養基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)保持細胞密度在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。
      3.  細胞總量到達2 x 109 收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

      注意:整個實驗過程中,細胞懸液吹打和培養容器拍打都要輕柔,以避免細胞損傷,保持細胞活性。

       

      Corning® NK細胞活化擴增培養套裝

      英文名:Corning® NK Expansion Kit

      中文名:Corning® NK細胞活化/擴增培養套裝

       

      應用:NK細胞活化擴增

      品牌產地:美國Corning

      保存:2°C - 8°C

       

      NK細胞是當今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養操作難度大,對培養條件、培養技術要求很高,難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養基套裝由多個組分組成,為 NK細胞培養提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數量產量高,活性高,具有很高的殺傷效應。

      產品組成

      NK細胞活化培養基

      NK細胞活化添加劑

      NK細胞擴增培養基

      抗體預包被T75細胞培養瓶

      細胞培養袋

       

      產品特色

      擴增能力強,在14天內可達到100倍擴增

      效應細胞比例高,可達80%

      操作方便

       

      產品訂購信息

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      Corning

      88-570-kit

      NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells

      NK細胞活化/擴增培養基套裝

      1Kit

      套裝包含

      活化用

      Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養瓶

      1瓶

      NK primary medium NK細胞活化培養基

      1×50 mL

      NK primary supplement NK細胞活化添加劑

      1×1.8 mL

      擴增用

      Expansion medium NK細胞擴增培養基

      1×1000 mL

      配件

      細胞培養袋

      1 x 640 cm2

       

       

       

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